酪氨酸磷酸化蛋白质组的分析涌出新方法
2016-09-23 15:21:35   来源:大连化学物理研究所
内容摘要
大连化物所与加拿大西安大略大学科研人员研究团队在蛋白质组翻译后修饰方面发展了多种分析新方法,显著提高了酪氨酸磷酸化蛋白质组的分析覆盖率和灵敏度。

酪氨酸激酶在细胞信号转导过程中具有重要的调控作用,其异常活化与众多疾病的发生和发展密切相关,因此是众多药物分子的靶标蛋白。由于受到高丰度丝氨酸/苏氨酸磷酸化的严重干扰,常规的磷酸肽富集策略对酪氨酸磷酸肽的富集效果较差。

到目前为止,基于抗体的酪氨酸磷酸化蛋白质富集策略是唯一行之有效的手段,但是该方法存在特异性差、重现性低、价格昂贵等缺点。

近日,中国科学院大连化学物理研究所生物分离分析新材料与新技术研究组(1809组)邹汉法、叶明亮等在磷酸化蛋白质组分析新方法研究方面取得新进展。该团队与加拿大西安大略大学教授李顺成研究团队利用生物分子之间的特异性识别作用建立了一种非抗体的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法,显著提高了酪氨酸磷酸化蛋白质组的分析覆盖率和灵敏度,相关研究成果以Article形式发表在《自然-化学生物学》(Nature Chemical Biology doi:10.1038/nchembio.2178)上。

大连化物所科研人员在蛋白质组翻译后修饰方面发展了多种分析新方法,包括建立了新型的固定金属离子亲和色谱磷酸肽富集技术和多维色谱分析新方法,实现了人肝磷酸化蛋白质组两万多个磷酸化位点(最大数据集)的系统鉴定;开展了修饰酶与底物的复杂体系酶促动力学的研究,发现修饰程度不依赖于蛋白质的丰度;建立了完整糖肽的质谱鉴定方法,实现了糖型特异性的糖基化蛋白质组学分析;发展了基于定量蛋白质组的修饰酶底物筛选方法,实现了激酶CK2和蛋白酶Caspase底物的规模化鉴定等。

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